This site uses cookies.
Some of these cookies are essential to the operation of the site,
while others help to improve your experience by providing insights into how the site is being used.
For more information, please see the ProZ.com privacy policy.
Freelance translator and/or interpreter, Verified site user
Data security
This person has a SecurePRO™ card. Because this person is not a ProZ.com Plus subscriber, to view his or her SecurePRO™ card you must be a ProZ.com Business member or Plus subscriber.
Access to Blue Board comments is restricted for non-members. Click the outsourcer name to view the Blue Board record and see options for gaining access to this information.
English to Polish: Clinical Protocol Summary: Study H6L-MC-LFAN
Source text - English Name of Sponsor Company:
Eli Lilly and Company
Name of Investigational Product:
LY450139
Title of Study: Effect of -Secretase Inhibition on the Progression of Alzheimer’s Disease: LY450139 versus Placebo
Number of Patients Planned: Screened: 2300
Randomized: 1500
Phase of Development: 3
Length of Study: Approximately 23 months on treatment (first patient in: March 2008; last patient out: February 2010). An open-label extension study is planned.
Objectives: LY450139 has a novel mechanism of action as a functional inhibitor of -secretase with the ability to inhibit the synthesis of amyloid-β (Aβ) potentially slowing the underlying rate of disease progression. The primary objective of this study is to test the hypothesis that LY450139 given orally will slow decline of AD as compared to placebo. Because of differences in regulatory requirements across regions of the world, this objective will be assessed using several measures. In one regulatory region, a given measure will be considered primary and the other measure secondary. This relationship will be reversed for the second regulatory region. In both scenarios, the measures will be evaluated sometime between 64 and 88 weeks after initiation of treatment. For the FDA, the primary objective will be assessed using a slope analysis of 2 coprimary outcomes, the Alzheimer’s Disease Assessment Scale—Cognitive subscore (ADAS-Cog11) and the Alzheimer’s Disease Cooperative Study—Activities of Daily Living Inventory (ADCS-ADL), in which the specific hypothesis is that the rate of change over time (slope) for LY450139 will be significantly less than that for placebo, as assessed using a repeated-measures model. For the Committee for Medicinal Products for Human Use (CHMP), the primary objective will be assessed by change from baseline to endpoint using 2 coprimary outcomes, the ADAS-Cog11 and ADCS-ADL. The specific hypothesis is that the change from baseline to endpoint will be significantly less than that for placebo, as assessed by a stratified analysis of baseline-to-endpoint change.
The secondary objectives of the study are: 1) to test the hypothesis that LY450139 is a disease-modifying medication independent of acute symptomatic effects; 2) to provide supporting evidence that LY450139 is a disease-modifying compound; 3) to compare the safety of LY450139 and placebo; 4) to characterize population pharmacokinetics (PK) of LY450139, explore potential factors that may influence variability of PK, and explore the association of PK variables with efficacy, biomarkers, and safety parameters; 5) to test the hypothesis that LY450139 will slow the rate of decline of AD, compared to placebo; and, 6) to assess global clinical benefit of treatment with LY450139.
Patients may choose to participate in the assessment of exploratory hypotheses relating to various biomarkers of disease progression.
Methodology: Study H6L-MC-LFAN (LFAN) will be a multicenter, randomized, double-blind, placebo-controlled, Phase 3 study comparing LY450139 140 mg, LY450139 100 mg, and placebo in approximately 1500 patients with mild to moderate AD. Patients who meet entry criteria will be randomized in a 1:1:1 ratio (500 per treatment arm) to 1 of the 3 treatment groups: LY450139 100 mg once daily, LY450139 140 mg once daily, or placebo once daily. Patients will be randomized by site and by mild or moderate Mini-Mental State Examination (MMSE) scores (for the purposes of this study, moderate will be defined as scores including 16 through 19, and mild as including 20 through 26). In addition, sometime after 64 weeks of treatment, patients receiving placebo will begin receiving LY450139 (escalated to 140 mg/day) for the remainder of the study. This “delayed-start” design feature will evaluate whether patients originally treated with placebo improve during this period such that their cognitive scores subsequently approximate those of the patients initially treated with LY450139. The absence of such an improvement—in other words, maintaining a statistical difference between patients initially assigned to LY450139 and placebo following the delayed start—would support the conclusion that LY450139 slows disease progression and does not affect simply symptoms of disease. Patients and investigators will be blinded to the timing of the delayed start of active treatment for the placebo-treated patients.
The study design is shown in the figure below.
Abbreviations: ED = early discontinuation; wk = week
Diagnosis and Main Criteria for Inclusion: Patients must meet National Institute of Neurological and Communicative Disorders and Stroke/Alzheimer’s Disease and Related Disorders Association (NINCDS/ADRDA) criteria for probable AD, have a Modified Hachinski Ischemia Scale score of 4, have an MMSE score of 16 through 26, have a Geriatric Depression Scale (GDS) score of 6 (on the staff-administered short form), have a magnetic resonance imaging (MRI) or computerized tomography (CT) scan within the past 2 years on file with the investigator with no findings inconsistent with a diagnosis of AD, and be at least 55 years old. If female, are post-menopausal, as evidenced by a lack of menstruation for at least 12 consecutive months or by having had a bilateral oophorectomy. Concurrent treatment with cholinesterase inhibitors or memantine is permitted if doses remain stable throughout the study. The full list of inclusion/exclusion criteria may be found in the Site Identification Questionnaire.
Test Product, and Mode of Administration: LY450139, taken orally, starting at 60 mg once-daily for 2 weeks and then escalating to 100 mg once daily; patients randomized to 140 mg once daily will be escalated again after taking 100 mg once daily for 2 weeks. At any point after Week 4 (Visit 5) of the study (when patients randomized to LY450139 are taking 140 mg once daily or 100 mg once daily), patients will be allowed to dose-reduce (from 140 mg/day to 100 mg/day or from 100 mg/day to 60 mg/day) in the case of AEs that appear to be drug-related and that, in the opinion of the site PI, would not allow continued participation in the study. Each patient will receive 3 tablets per day
Reference Therapy and Mode of Administration: Because the LY450139 dose strengths are a different size and color, a “triple-dummy” design will be used, in which patients receive placebo tablets with LY450139 tablets to match the strength(s) that is/are not being dosed. Each patient will receive 3 tablets per day.
Criteria for Evaluation:
Safety: Routine physical and neurological examinations will include vital signs and laboratory evaluations. Blood pressure and pulse will be measured supine and standing at designated visits and sitting only at all other visits. Twelve-lead ECGs will be obtained in triplicate and QRS interval, QT interval, and heart rate values from these ECGs will be used to calculate either an average QTc interval (for patients with a normal QRS interval) or an average JTc interval.
Efficacy: The Alzheimer’s Disease Assessment Scale—Cognitive subscale (ADAS-Cog) and Alzheimer’s Disease Cooperative Study Activities of Daily Living Inventory (ADCS-ADL) cognitive testing instruments will be used in this study. The ADAS-Cog11 score will be derived from an extended ADAS-Cog, the ADAS-Cog14, which will be the actual scale administered to patients. Several biomarkers will be assessed as secondary efficacy measures using study addenda. Information about these assessments is provided in the addenda. Additional secondary clinical outcome measures include: The Clinical Dementia Rating Scale (CDR); Neuropsychiatric Inventory (NPI); Resource Utilization in Dementia—Lite questionnaire (RUD-Lite); and the EuroQoL-5D (EQ-5D).
Bioanalytical: Blood samples collected to measure the concentration of donepezil, study drug, and study drug metabolites (as appropriate).
Pharmacokinetic: All plasma LY450139 concentration-time data will be pooled and evaluated by a population PK approach. A covariate screen of subject-specific factors will be included in the analyses based on those factors investigated in previous and ongoing PK analyses and those appropriate for the target population. An exploratory analysis to investigate a relationship between plasma LY450139 and the proximal secondary endpoint (plasma A) at Weeks 0, 12, and 52 will also be conducted. Other analyses of efficacy and safety outcome measures may also be assessed as scientifically appropriate and warranted by available data.
Evaluation Methods:
Statistical: The primary objective of this study is to test the hypothesis that LY450139 given orally will slow decline of AD as compared to placebo. For the FDA, this will be assessed using a slope analysis of 2 coprimary outcomes (ADAS-Cog11 and ADCS-ADL), in which the specific hypothesis is that the rate of change over time (slope) for LY450139 will be significantly less than that for placebo, as assessed using a repeated measures model. Specifically, each of the two primary endpoints, ADAS-Cog11 and the ADCS-ADL, will be analyzed separately using a repeated-measures mixed model analysis. For the CHMP, the primary objective will be assessed by change from baseline to endpoint using 2 coprimary outcomes: the ADAS-Cog11 and the ADCS-ADL. The specific hypothesis is that the change from baseline to endpoint will be significantly less than that for placebo, as assessed by a stratified analysis of baseline to endpoint change. Change from baseline difference in the MMSE scores will also be analyzed using a repeated measures mixed model analysis.
Safety: Safety will be assessed by summarizing and analyzing TEAEs, laboratory analytes, vital signs, and ECGs during the initial treatment period. A blinded Clinical Endpoint Committee (CEC) will review and adjudicate specific safety endpoints. Unblinded data on safety-related endpoints and SAEs will be periodically reviewed by the Data Monitoring Committee (DMC).
Translation - Polish Nazwa firmy sponsorującej:
Eli Lilly and Company
Nazwa badanego wyrobu:
LY450139
Tytuł badania: Wpływ inhibicji -sekretazy na postęp choroby Alzheimera: LY450139 w porównaniu z placebo
Planowana liczba pacjentów: zakwalifikowanych: 2300
randomizowanych: 1500
Faza badania: 3
Okres trwania badania: około 23 miesięcy leczenia (przyjęcie pierwszego pacjenta: marzec 2008; wypisanie ostatniego pacjenta: luty 2010). Planowana jest kontynuacja badania klinicznego metodą otwartej próby.
Cele: LY450139 wykazuje nowy mechanizm działania jako funkcjonalny inhibitor -sekretazy wykazujący zdolność do hamowania syntezy amyloidu-β (Aβ), spowalniając prędkość postępu choroby, który zależy od wspomnianej syntezy. Pierwszorzędnym celem tego badania jest weryfikacja hipotezy, że LY450139 podawany doustnie będzie spowalniał postęp choroby Alzheimera w porównaniu z placebo. Z powodu różnych regulacji prawnych w poszczególnych rejonach świata, cel ten będzie oceniany przy zastosowaniu kilku różnych metod. Na jednym z obszarów pewna metoda będzie uważana za metodę pierwszorzędną a inna za drugorzędną. W obydwu scenariuszach zastosowane metody zostaną poddane ocenie pomiędzy 64 a 88 tygodniem od rozpoczęcia leczenia. Dla Agencji ds Żywności i Leków (FDA) cel pierwszorzędny będzie oceniony metodą porównania szbkości pogarszania się wyniku klinicznego w czasie z nachylenia krzywej (slope analysis) dla 2 równoległych pierwszorzędnych wyników, w Skali Oceny Choroby Alzheimera - podgrupa kognitywna (Alzheimer’s Disease Assessment Scale—Cognitive subscore (ADAS-Cog11) oraz w skali Badanie Wspólne Choroby Alzheimera - Inwentarz Aktywności Dnia Codziennego ( the Alzheimer’s Disease Cooperative Study—Activities of Daily Living Inventory (ADCS-ADL), w których konkretną hipotezą jest założenie, że szybkości zmian w czasie (nachylenie krzywej) dla LY450139 będzie znacznie mniejsza w porównaniu z placebo, stwierdzona przy pomocy modelu powtarzanych miar. Dla Komitetu ds. Produktów Leczniczych Stosowanych u Ludzi (Committee for Medicinal Products for Human Use (CHMP)), cel pierwszorzędny będzie oceniony zmianą od linii podstawowej do punktu końcowego przy użyciu 2 wyników równolegle pierwszorzędnych: ADAS-Cog11 and ADCS-ADL. Odpowiednią hipotezą jest założenie, że zmiana od linii podstawowej do punktu końcowego będzie znacznie mniejsza w porównaniu z placebo, na podstawie oceny przeprowadzonej metodą analizy stratyfikowanej od linii podstawowej do punktu końcowego.
Celedrugorzędne badania to: 1) sprawdzenie hipotezy, że LY450139 jest lekiem modyfikującym chorobę, niezależnie od ostrych skutków objawowych; 2) dostarczenie dowodów na to, że LY450139 jest związkiem modyfikującym chorobę; 3) porównanie bezpieczeństwa LY450139 i placebo; 4) scharakteryzowanie farmakokinetyki populacyjnej (FP) leku LY450139, zbadanie potencjalnych czynników, które mogą mieć wpływ na zmienność FP, zbadanie związku zmiennych FP ze skutecznością, biomarkerami i parametrami bezpieczeństwa; 5) sprawdzenie hipotezy, że LY450139 spowolni prędkość pogarszania się choroby Alzheimera w porównaniu z placebo; a także, 6) ocena globalnych korzyści klinicznych z leczenia lekiem LY450139.
Pacjenci mogą uczestniczyć w weryfikowaniu hipotez badawczych odnoszących się do różnych biomarkerów postępu choroby.
Metodologia: Badanie H6L-MC-LFAN (LFAN) będzie wieloośrodkowym, randomizowanym badaniem podwójnie ślepym, kontrolowanym placebo, 3 fazy, w celu porównania LY450139 140 mg, LY450139 100 mg, i placebo u około 1500 pacjentów chorych na chorobę Alzheimera w stopniu łagodnym do umiarkowanego. Pacjenci, którzy spełnią kryteria włączenia do badania zostaną poddani randomizacji w stosunku 1:1:1 (500 w jednej podgrupie) i przypisani do jednej z trzech podgrup objętych badaniem: LY450139 100 mg raz dziennie, LY450139 140 mg raz dziennie, lub placebo raz dziennie. Pacjenci zostaną poddani randomizacji według lokalizacji oraz według oceny ciężkości choroby (łagodna lub umiarkowana (Mini-Mental State Examination) (MMSE) (dla celów tego badania, choroba umiarkowana będzie określana jako mająca ocenę od 16 do 19 punktów a łagodna - z oceną od 20 do 26 punktów). Ponadto po 64 tygodniach leczenia pacjenci otrzymujący placebo zaczną otrzymywać LY450139 (w zwiększonej dawce do 140 mg/dzień) przez pozostały okres badania. Tego rodzaju charakterystyka "opóźnionego startu" pozwoli na ocenę, czy pacjenci pierwotnie leczeni placebo ulegli poprawie w tym okresie tak, że wyniki ocey funkcj poznawczych są bliskie wynikom u pacjentów leczonych początkowo LY450139. Brak takiej poprawy - innymi słowy utrzymanie statystycznej różnicy pomiędzy pacjentami początkowo przypisanymi do grupy LY450139 i placebo po opóźnionym starcie - świadczyłoby o tym, że LY450139 spowalnia postęp choroby i po prostu nie wpływa na objawy choroby. Pacjenci i badacze będą zaślepieni w odniesieniu do momentu opóźnionego startu aktywnego leczenia pacjentów, którym podawano placebo.
Plan badania pokazany jest na rysunku poniżej.
Skróty: ED = wcześniejsze przerwanie uczestnictwa; wk = tydzień
Diagnoza i Głowne Kryteria Kwalifikacyjne: Pacjenci muszą spełniać kryteria ustalone przez National Institute of Neurological and Communicative Disorders and Stroke/Alzheimer’s Disease and Related Disorders Association (NINCDS/ADRDA) co do prawdopodobieństwa występowania u nich choroby Alzheimera, posiadać wynik oceny w skali Modified Hachinski Ischemia 4, wynik MMSE wynoszący 16 do 26, wynik w skali Geriatric Depression Scale (GDS) równy 6 (w wersji skróconej wypełnianej przez personel), mieć wykonane badania metodą obrazowania rezonansem magnetycznym (MRI) lub tomografią komputerową (CT) wykonane w ciągu ostatnich 2 lat , które zostały dostarczone badaczowi, z wynikami zgodnymi z diagnozą choroby Alzheimera, i być w wieku przynajmniej 55 lat. W przypadku kobiety warunkiem jest wiek pomenopauzalny potwierdzony brakiem miesiączki przez co najmniej 12 kolejnych miesięcy lub po obustronnej operacji usunięcia jajników. Jednoczesne leczenie inhibitorami cholinoesterazy lub memantyną jest dopuszczalne, jeśli dawki pozostają stabilne przez cały okres badania. Pełna lista kryteriów włączenia/ wyłączenia znajduje się w kwestionariuszu identyfikacji ośrodka badań (Site Identification Questionnaire).
Wyrób badany i sposób podawania: LY450139, przyjmowany doustnie, przy dawce początkowej 60 mg raz dziennie przez 2 tygodnie a następnie zwiększenie dawki do100 mg raz dziennie; pacjenci zaliczeni losowo do grupy otrzymującej 140 mg raz dziennie, znowu zaczną dostawać zwiększoną dawkę po okresie przyjmowania dawki 100 mg raz dziennie przez 2 tygodnie. W dowolnym momencie po 4 tygodniu (Wizyta 5) badania (kiedy pacjenci zaliczeni losowo do grupy otrzymującej LY450139 przyjmują dawkę 140 mg raz dziennie lub 100 mg raz dziennie), będzie można zmniejszyć dawkę pacjentom (ze 140 mg/dzień do 100 mg/dzień lub ze 100 mg/dzień do 60 mg/dzień) w przypadku wystąpienia zdarzeń niepożądanych, które wydają się być spowodowane zastosowanym leczeniem (TEAC) , a to, zdaniem Głównego Badacza, nie pozwoliłoby na kontynuowanie uczestnictwa w badaniu. Każdy pacjent będzie otrzymywał 3 tabletki dziennie.
Terapia referencyjna i sposób podawania leku: Ponieważ tabletki LY450139 w różnych dawkach różnią się wielkością i kolorem, zostanie zastosowany schemat "potrójnie pozorowany", w którym pacjenci otrzymują tabletki placebo z tabletkami LY450139 pasującymi do dawki/ dawek o określonej mocy, a która/e nie jest/ są dawkowane. Każdy pacjent otrzyma 3 tabletki dziennie
Kryteria oceny:
Bezpieczeństwo: Rutynowe badanie fizykalne i neurologiczne będzie obejmowało ocenę objawów czynności życiowych i wyniki badań laboratoryjnych. Ciśnienie tętnicze i tętno będą mierzone w pozycji leżącej na plecach oraz w pozycji stojącej podczas określonych wizyt a wyłącznie w pozycji siedzącej w czasie pozostałych wizyt. Dwunastoodprowadzeniowe EKG będą mierzone trzykrotnie, a wartości odstępu QRS, odstępu QT, i częstości akcji serca otrzymane z tych elektrokardiogramów będą wykorzystane do obliczenia albo średniego odstępu QTc (dla pacjentów z normalnym odstępem QRS) albo średniego odstępu JTc .
Skuteczność: W badaniu tym będą zastosowane instrumenty badawcze do oceny funkcji poznawczych w skalach: Alzheimer’s Disease Assessment Scale—Cognitive subscale (ADAS-Cog) oraz Alzheimer’s Disease Cooperative Study Activities of Daily Living Inventory (ADCS-ADL). Wartości ADAS-Cog11 zostaną znalezione z rozszerzonej skali ADAS-Cog, ADAS-Cog14, która będzie rzeczywistą skalą zastosowaną wobec pacjentów . Jako drugorzędne wskaźniki skuteczności zostanie poddanych ocenie szereg biomarkerów na podstawie uzupełnienia do badania. Informacje o tych ocenach podane są we wspomnianym uzupełnieniu. Jako dodatkowe miary oceny wyników klinicznych wykorzystano: The Clinical Dementia Rating Scale (CDR); Neuropsychiatric Inventory (NPI); Resource Utilization in Dementia—Lite questionnaire (RUD-Lite); oraz EuroQoL-5D (EQ-5D).
Analizy: Próbki krwi pobrane w celu oznaczenia stężenia donepezilu, badanego leku, oraz metabolitów badanego leku (jeśli będzie to właściwe).
Farmakokinetyka: Wszystkie dane stężenia LY450139 w osoczu w zależności od czasu zostaną zebrane i ocenione metodą farmakokinetyki populacyjnej. Do analiz opartych o czynniki charakterystyczne dla osobnika zostanie dołączone badanie skriningowe kowariancyjne tych czynników badanych we wcześniej wykonanych jak i w bieżących analizach FP oraz w analizach właściwych dla adresowanej populacji. Zostanie również przeprowadzona analiza badawcza w celu zbadania zależności pomiędzy LY450139 w osoczu a proksymalnym drugorzędnym punktem końcowym ( A w osoczu ) w tygodniach badania 0, 12, i 52. Innego rodzaju analizy miar wyników skuteczności i bezpieczeństwa również można poddać ocenie jeśli jest to naukowo uzasadnione i posiadane dane na to pozwolą.
Metody oceny:
Statystyczne: Celem pierwszorzędnym niniejszego badania jest sprawdzenie hipotezy, że LY450139 podawany doustnie spowoduje spowolnienie pogarszania się choroby Alzheimera w porównaniu z placebo. Dla FDA ocena tego działania będzie dokonana na podstawie analizy nachylenia krzywej dwóch równolegle pierwszorzędnych wyników (ADAS-Cog11 i ADCS-ADL), gdzie konkretna hipoteza brzmi, że szybkość zmiany w czasie (nachylenie krzywej) dla LY450139 będzie wyraźnie mniejsza w porównaniu z placebo, jak to stwierdzono przy zastosowaniu modelu powtarzanych miar. Konkretnie każdy z tych dwóch punktów końcowych, ADAS-Cog11 i ADCS-ADL, będzie analizowany oddzielnie przy pomocy modelu mieszanego w analizie powtarzanych miar. Dla Komitetu ds. Produktów Leczniczych Stosowanych u Ludzi (Committee for Medicinal Products for Human Use, CHMP), cel pierwszorzędny będzie oceniony zmianą od linii podstawowej do punktu końcowego przy użyciu 2 jednoczesnych wyników pierwszorzędnych: ADAS-Cog11 i ADCS-ADL. Odpowiednią hipotezą jest założenie, że zmiana od linii podstawowej do punktu końcowego będzie znacznie mniejsza w porównaniu z placebo, na podstawie oceny tej zmiany metodą analizy stratyfikowanej od linii podstawowej do punktu końcowego. Również zostanie poddana analizie zmiana różnicy w stosunku do linii bazowej w wynikach oceny MMSE z zastosowaniem analizy przy pomocy mieszanego modelu w analizie powtarzanych miar.
Bezpieczeństwo: będzie ocenione przez sumę i analizę zdarzeń niepożądanych uznanych za związane z leczeniem badanym lekiem (TEASE), z analiz laboratoryjnych, oceny objawów czynności życiowych, oraz EKG w początkowym okresie leczenia. "Zaślepiony" Komitet ds. Klinicznego Punktu Końcowego (CIEC) dokona oceny i podejmie decyzję co do konkretnych punktów końcowych dotyczących bezpieczeństwa. Odślepione dane dotyczące punktów końcowych związanych z bezpieczeństwem i z poważnymi zdarzeniami niepożądanymi będą okresowo oceniane przez Komitet ds Monitorowania Danych (Data Monitoring Communities) (DMC).
English to Polish: BIOARTIFICIAL IMPLANT AND ITS USE AND METHOD OF REDUCING THE RISK FOR
Source text - English Note: Within nine months of the publication of the mention of the grant of the European patent in the European Patent
Bulletin, any person may give notice to the European Patent Office of opposition to that patent, in accordance with the
Implementing Regulations. Notice of opposition shall not be deemed to have been filed until the opposition fee has been
paid. (Art. 99(1) European Patent Convention).
Printed by Jouve, 75001 PARIS (FR)
(19)
EP 1 667 746 B1
Translation - Polish (19) Europejskie Biuro Patentowe (oraz logo) (11) EP 1 667 746 B1
(21) Numer zgłoszenia: 04775510.3 (86) Numer zgłoszenia międzynarodowego:
PCT/SE2004/001418
(22) Data zgłoszenia: 04.10.2004
(87) Numer publikacji zgłoszenia międzynarodowego:
WO 2005/030283 (07.04.2005 Gazette 2005/14
(54) WSZCZEP BIOSYNTETYCZNY I JEGO ZASTOSOWANIE ORAZ METODA ZMNIEJSZENIA RYZYKA TWORZENIA SIĘ TKANKI ŁĄCZNEJ PO JEGO WSZCZEPIENIU
(84) Wyznaczone państwa objęte umową:
AT BE BG CH CY CZ DE DK EE ES FI FR GB GR
HU IE IT LI LU MC NL PL PT RO SE SI SK TR
Wyznaczone państwa dodatkowe:
AL LT LV MK
(30) Pierwszeństwo: 02.10.2003 SE 0302599
(43) Data publikacji zgłoszenia:
14.06.2006 Bulletin 2006/24
(73) Uprawniony z patentu: Tikomed AB
260 40 Viken (SE)
(72) Twórcy wynalazku:
BRUCE, Adam
S-260 40 Viken (SE)
BRUCE, Lars
S-260 40 Viken (SE)
NILSSON, Bo
S-756 47 Uppsala (SE)
KORSGREN, Olle
S-756 45 Uppsala (SE)
(74) Pełnomocnik: Sjölander, Henrik
Aros Patent AB
P.O. Box 1544
751 45 Uppsala (SE)
Uwaga: Każdy może zgłosić sprzeciw w odniesieniu do tego patentu do Europejskiego Urzędu Patentowego w ciągu dziewięciu miesięcy od dnia publikacji wymieniającej udzielenie patentu europejskiego w Biuletynie Patentów Europejskich European Patent Bulletin), zgodnie z przepisami wykonawczymi. Sprzeciw taki nie będzie uznawany za zgłoszony do momentu wniesienia należnej opłaty (art. 99(1) Europejskiej Konwencji Patentowej).
____________________________________________________________________________________
Druk Jouve, 75001 Paris (FR)
Opis wynalazku
Dziedzina wynalazku
[0001] Techniczna dziedzina niniejszego wynalazku dotyczy biosyntetycznych wszczepów w oparciu o półprzepuszczalną przegrodę (barierę, błonę).
Tło historyczne wynalazku
[0002] W technice przeszczepów organów znany jest fakt, że organizm ludzki przeciwstawia się przeszczepowi organu lub tkanki przez zjawisko odrzucania powodowane przez mechanizm odpornościowy organizmu. W celu uniknięcia stosowania leków immunosupresyjnych (efekty drugorzędne, naruszenie obrony odpornościowej) opracowano wszczepy biosyntetyczne, składające się z tkanki lub komórek dawcy, które mają być przeszczepione i półprzepuszczalnej przegrody czyli "filtru", który ma za zadanie umożliwienie dyfuzji składników odżywczych oraz tlenu z organizmu biorcy do wszczepionej (to znaczy przeszczepionej) tkanki lub komórek dawcy, ale nie pozwalającego na dyfundowanie czynników (komórek) obronnych biorcy, jednocześnie umożliwiając dyfuzję potrzebnych substancji wytwarzanych przez tkanki lub komórki dawcy do organizmu biorcy. Przykładami w literaturze patentowej tego rodzaju biosyntetycznych wszczepów są patenty: US-A-6,632,244 i WO 02/02745, gdzie dyskutowane jest w szczególności przeszczepianie izolowanych wysepek Langerhansa (biosyntetyczna trzustka) do wytwarzania insuliny w organizmie biorcy. W patencie US 6,632,244 rozważane jest również ryzyko zwłóknienia (rozrostu tkanki łącznej) w organizmie biorcy, powodujące pokrywanie porów w przegrodzie przez tkankę łączną, skutkiem czego wszczep "umiera z głodu" (z niedotlenienia), ponieważ nie otrzymuje ani tlenu ani składników odżywczych z organizmu biorcy. Zjawisko to występuje w materiałach przegrody, które nie są biologicznie kompatybilne (zgodne). Według tego ostatniego patentu niedogodność tę można usunąć stosując wszczep biologicznie zgodny w postaci cienkiego arkusza składającego się z trzech składników: (a) rdzenia, stanowiącego żywą tkankę, czynniki troficzne oraz komórki podporowe, polimer alginianowy sieciowany na przykład wapniem, oraz siatkę z włókna dla nadania wytrzymałości mechanicznej, (b) powłoki z polimeru alginianowego sieciowanego wapniem dla regulacji przepuszczalności, oraz (c) warstwy również składającej się z sieciowanego polimeru alginianowego. Zalecana grubość wszczepu wynosi maksymalnie 400 μm.
[0003] Przeszczep, który również jest pokryty alginianem (wielowarstwowo), ujawniono w patencie US-5,876,742. Jak stwierdzono w opisie tego patentu, powłoka ta nie jest fibrogeniczna. Grubość powłoki wynosi od 20 do 200 μm.
[0004] Patent US-A-5,782,912 opisuje wszczep, którego ściankę stanowi pierwsza błona porowata, a która jest proksymalna w stosunku do tkanki biorcy i o której twierdzi się, że sprzyja tworzeniu się struktur naczyniowych na powierzchni styku błony biorcy i gdzie zapobiega powstawaniu tkanki łącznej. Omawiany wszczep posiada również drugą porowatą błonę tworzącą przestrzeń immunoizolującą. Przestrzeń ta zamyka tkankę, wysepki trzustkowe, które muszą być chronione przed zetknięciem się z komórkami biorcy. Wspomniana druga błona umożliwia dyfuzję składników, które wytwarzane są przez zamkniętą tkankę, na przykład wytwarzającą insulinę. Błona ta pozwala również na dyfuzję składników odżywczych od biorcy do wspomnianej przestrzeni w celu dostarczenia tkance składników odżywczych. Błony wykonane są z polimeru a pierwsza błona posiada specjalną strukturę z trójwymiarowymi porami. Omawiana publikacja patentowa podaje, że "Znane, biologicznie zgodne, wszczepy medyczne składają się z materiałów ceramicznych i metali. Zakładając, że materiały te można by dopasować tak, że powstałyby opisywane tu trójwymiarowe struktury, to byłyby one użyteczne również dla celów niniejszego wynalazku".
[0005] Patent US-A-5,782,912 ujawnia również zastosowanie wspomnianego wyrobu jako powłoki założonego na stałe czujnika czy założonego na stałe cewnika, jako środek transportu leków z komory lub cewnika do tkanki biorcy oraz jako środek enkapsulacji przeszczepionych komórek przy leczeniu niedoborów komórkowych i molekularnych (immunoizolacja).
[0006] Patent US-B-6372244 opisuje biosyntetyczny wszczep, w którym półprzepuszczalna przeszkoda alginianowa może być pokryta biologicznie zgodnym żelem alginianowym. Rozmiary wspomnianego wszczepu są tak dobrane, żeby można było utrzymać żywotność komórek za pośrednictwem biernej dyfuzji składników odżywczych a najlepiej takie rozmiary, żeby umożliwiały utrzymanie wysokiej gęstości ogólnej.
[0007] Opisane powyżej wszczepy i inne wszczepy stosujące przegrody półprzepuszczalne charakteryzują się złożoną budową i są trudne do wytworzenia. Istnieją również powody do przypuszczeń, że okoliczności te nie zachodzą w przypadku wszczepów dobrze odtwarzalnych posiadających pożądane właściwości. Należy również przypuszczać, że waskularyzująca przegroda znanych wszczepów nie jest optymalnie skuteczna w zapobieganiu zwłóknieniu, ponieważ nie jest brana pod uwagę wypełniona cieczą przestrzeń pomiędzy tkanką łączną a barierą.
Przedmiot wynalazku
[008] Przedmiotem wynalazku jest biologicznie zgodny, półprzepuszczalny wszczep w rodzaju jak opisano powyżej, to znaczy posiadający właściwości waskularyzujące, powstrzymujące wzrost tkanki łącznej (zwłóknienie), prostszej budowy i łatwiejszy do wykonania niż wszczepy znane w odnośnej technice.
Streszczenie wynalazku
[0009] Przedmiot wynalazku realizowany jest w postaci wszczepu o cechach podanych w zastrzeżeniu 1.
Korzystne realizacje tego wynalazku posiadają cechy charakterystyczne opisane w zastrzeżeniach zależnych.
[0010] Niniejszy wynalazek opiera się na naszym zdumiewającym odkryciu, że jeśli zwykłą półprzepuszczalną przegrodę ("filtr", " błonę") przystosowaną do wszczepienia do organizmu człowieka, która zdolna jest do wybiórczego przepuszczania składników odżywczych, tlenu, innych gazów, substancji tkankowych czy komórkowych, linii komórek, ale przez które nie dyfundują żadne elementy obrony odpornościowej, wyposaży się w przepuszczalną powłokę z metalu biologicznie zgodnego lub biologicznie czynnego, to problem zwłóknienia zostanie w znacznym stopniu wyeliminowany.
[0011] Przeprowadzone doświadczenia dają nam podstawy do przypuszczeń, że tego rodzaju działanie przeciwko zwłóknieniu wynika z faktu, że naczynia krwionośne biorcy, u którego wszczepiono przegrodę z biologicznie aktywną powłoką, "przyciągane" są do powierzchni powłoki i wzrastają razem z nią. W wyniku tego wzrost tkanki łącznej, zwłóknienie, w sąsiedztwie tej powierzchni zostaną zablokowane, a wspomniany wzrost tkanki łącznej nie będzie miał czasu na to, aby na nowo się rozpocząć przed wzrostem naczyń krwionośnych w sąsiedztwie powierzchni biologicznie czynnej powłoki. Naczynia krwionośne i wzrost naczyń krwionośnych znajdujących się w sąsiedztwie powierzchni biologicznie czynnej powłoki z kolei powoduje to, że czynniki odżywcze i tlen z naczyń krwionośnych mogą być przenoszone (mogą dyfundować) przez wszczep bez przeszkód ze strony tkanki łącznej.
[0012] "Przyciąganie" nie należy tutaj rozumieć w dosłownie naukowym znaczeniu, ponieważ mechanizm tego efektu jeszcze nie został poznany. Wyrażenie to ma raczej sugerować, że zgodnie z naszymi wynikami badań naczynia krwionośne nie wzrastają (wzrastają w niewielkim stopniu) w konwencjonalnej przegrodzie i w sąsiedztwie jej powierzchni, przegrodzie nazywanej tutaj biologicznie zgodną lub niezgodną, podczas gdy naczynia krwionośne wzrastają w sąsiedztwie takiej powłoki z biologicznie czynnego metalu nałożonej na konwencjonalną przegrodę.
[0013] Należy zauważyć, że metalowego pokrycia nie należy traktować jako przegrody półprzepuszczalnej oprócz konwencjonalnej przegrody półprzepuszczalnej, na którą nałożono warstwę metalową. Jest to sytuacja przeciwna do takiej, jaką spotykamy w uprzednio wspomnianych patentach z warstwą alginianową lub błoną polimerową, która dodatkowo wywiera wpływ waskularyzujący i powstrzymujący zwłóknienie na znajdującej się pod nią półprzepuszczalnej przegrodzie lub błonie. Warstwa alginianowa czy polimerowa jest sama z siebie warstwą półprzepuszczalną i odpowiedzialna jest za przepuszczalność wszczepu, różniącą się od przepuszczalności położonej pod nią półprzepuszczalnej przegrody. Pokrycie metalem wszczepu według wynalazku nie wykazuje takiego działania.
Przykład 1
[0014] Różnicę w odniesieniu do wzrostu tkanki łącznej w związku ze wszczepem półprzepuszczalnej przegrody bez biologicznie czynnej powłoki metalowej i zgodnie z wynalazkiem, z taką biologicznie czynną powłoką metalową przedstawiono na rysunkach 1 i 2.
[0015] Rysunek 1 przedstawia zdjęcie obrazu otrzymanego mikroskopem świetlnym przedstawiające konwencjonalny wszczep, obejmujący wysepki Langerhansa 1 wtopione w przegrodę alginianową 2, który znajduje się w stanie po przeszczepie. Warstwa oznaczona jako 3 została zidentyfikowana jako tkanka łączna. Na zdjęciu widać, że tkanka łączna 3 jest umiejscowiona blisko wszczepu. pomiędzy wszczepem a naczyniem krwionośnym biorcy 4.
[0016] Na rysunku 2 pokazano wszczep, który składa się z konwencjonalnej półprzepuszczalnej przegrody 2', która z jednej strony, zgodnie z wynalazkiem, pokryta jest powłoką tytanową T. Składnik oznaczony jako 4' przedstawia naczynie krwionośne. Umiejscowione jest ono blisko powłoki tytanowej T i nawet do pewnego stopnia przenika w głąb tej powłoki. Pomiędzy naczyniem krwionośnym a przegrodą nie ma żadnej tkanki łącznej. Na drugiej stronie przegrody, gdzie nie ma żadnej powłoki tytanowej, prawie zupełnie nie występują żadne naczynia krwionośne.
Realizacje wynalazku
Półprzepuszczalna przegroda
[0017] Półprzepuszczalna przegroda wszczepu, która jest wykonana z materiału polimerowego, o właściwościach podanych powyżej w odniesieniu do uprzednio wspomnianego transportu, może być z rodzaju znanego we wcześniejszym stanie techniki, przykładowo takiego, jak określono w wyżej wymienionym patencie US 6,372,244, bądź też z innego materiału z rodzaju, który byłby kompatybilny z tkanką, przykładowo z materiału GoreTex®. Przegrody półprzepuszczalne z innych materiałów, jak na przykład węglowodany, celuloza, tworzywo sztuczne (na przykład poliwęglanowe), hydrożele, są obecnie dostępne na rynku, na przykład produkcji takich firm jak: Millipore Inc., Baxter Inc., Amicon oraz Pall Corporation. Są one dostępne w handlu lub dostarczane na zamówienie z różną wielkością porów w zależności od tego co ma być zatrzymane albo przepuszczane. Na rynku dostępne są na przykład przegrody półprzepuszczalne powstrzymujące dyfuzję komórek (obrona odpornościowa) ale przepuszczające cząsteczki (składnika odżywczego i tlenu a także substancje z organizmu biorcy, któremu wszczepiono przegrodę) oraz substancje z organu lub części organu lub tkanki dawcy obecne w przegrodzie do organizmu biorcy, przykładowo insulina wytworzona przez wysepki Langerhansa wszczepione do organizmu biorcy. Wspomniana przegroda może mieć postać arkusza, w którym umieszczona jest wszczepiana tkanka lub komórki, bądź w postaci pojemnika (woreczka, rękawa) zawierającego komórki lub tkanki, jakie mają być wszczepione. W tym przypadku czynna biologicznie powłoka jest przynajmniej umieszczona na zewnątrz pojemnika.
Biologicznie czynna metalowa powłoka i jej nakładanie
[0018] Biologicznie czynna metalowa powłoka wszczepu powinna być przepuszczalna, to znaczy posiadać pory czyli otwory pozwalające na przechodzenie (dyfuzję) składników odżywczych, tlenu, substancji tkankowych czy komórkowych, to znaczy powłoka ta nie powinna przeszkadzać w działaniu półprzepuszczalnej przegrody i powodować, że cel, w jakim została wprowadzona, zostanie osiągnięty. Wielkość porów nie musi jednakże uniemożliwiać dyfuzji elementów układu odpornościowego, bowiem czyni to już półprzepuszczalna przegroda. Przepuszczalność powłoki powinna być zatem przynajmniej taka sama jak przepuszczalność przegrody (biorąc pod uwagę niewielki wpływ metalowej powłoki na ściankach półprzepuszczalnej przegrody). Powłoka może składać się z proszku albo pyłu naniesionego na powierzchnię przegrody znaną w technice metodą rozpyłową, albo metodą cienkowarstwową, jak na przykład przez naparowanie (osadzanie cienkich warstw z fazy gazowej czyli PVD tj. Physical Vapour Deposition), napylanie lub czy to w postaci siatki lub perforowanej (na przykład przy użyciu lasera) folii, która przymocowana jest w odpowiedni sposób, na przykład przez przyklejenie, do przegrody z użyciem kleju biologicznego lub przyspawana do niej za pomocą lasera. Przymocowanie folii przez jej przyszycie jest również dopuszczalną metodą. Można też "posypać" barierę ziarnami substancji mających utworzyć powłokę. Przy wyborze metody osadzenia powłoki na przegrodzie należy oczywiście wziąć pod uwagę charakter materiału przegrody, zwłaszcza jego odporność na temperaturę.
[0019] Powłoka powinna być w dużym stopniui ciągła, to znaczy, że powinna zapobiegać wzrostowi tkanki łącznej na znajdującej się pod nią półprzepuszczalnej przegrody. Chociaż wymóg ten prawie nie występuje przy powłoce z folii, to inaczej jest, kiedy powłoka naniesiona jest na przegrodę półprzepuszczalną metodą, w której powłoka tworzona jest przez cząsteczki naniesione na przykład przez napylanie, naparowanie, lub przez chemiczne strącenie. Należy zatem upewnić się, że powłoka z czynnego biologicznie materiału naniesiona na półprzepuszczalną przegrodę jest równa i bez większych grudek, które mogłyby powodować wzrost tkanki łącznej. Z drugiej strony należy również zadbać o to, aby zbytnia przesada przy realizacji warunku tworzenia powłoki bez grudek nie prowadziła do nałożenia zbyt grubej powłoki, która zatykałaby pory półprzepuszczalnej przegrody.
[0020] Stwierdzono, że doskonałe rezultaty (opisany powyżej transport i zapobieganie zwłóknieniu) osiąga się stosując powszechnie znane dzisiaj metody nakładania materiałów dające grubość metalowej powłoki od około 5 nm i więcej, najkorzystniej od około 50 do 250 nm, niezależnie od wielkości porów przegrody.
[0021] W odniesieniu do powyższego stwierdzenia należy zauważyć, że zgodnie z niniejszym wynalazkiem, nie można wykluczyć, że cząstki biologicznie czynnego materiału w trakcie nanoszenia tego materiału wnikają w głąb porów/ otworów przegrody powodując zmniejszenie ich liczby dopóki wspomniane pory/ otwory pozostają dostępne dla wspomnianego transportu lub dyfuzji.
Metal biologicznie czynny
[0022] Metal biologicznie czynny należy rozumieć jako metal wykazujący zgodność (kompatybilność) biologiczną (jest biologicznie kompatybilny), który oprócz wspomnianej kompatybilności biologicznej zdolny jest, jak to już wcześniej wspomniano, do "przyciągania" tkanki i zakotwiczania jej w sobie. Jak wiadomo, metale takie to tytan, cyrkon, tantal i ich odpowiednie stopy. Według niniejszego wynalazku za najbardziej odpowiedni metal biologicznie czynny uznano tytan.
Przykład 2, Rys. 3
[0023] Naniesiono powłokę tytanową na jednej stronie celulozowej półprzepuszczalnej przegrody będącej Diaflo YM5 LOT AN 01383 produkcji Amicon. Nałożenie powłoki wykonano metodą naparowania w aparacie produkcji firmy Edwards Inc. Nałożona warstwa miała grubość 30 nm. Wynik operacji przedstawiono na Rys. 3, z którego wynika, że pory przegrody celulozowej nie zostały zatkane przez cząstki tytanu, to znaczy, że struktura powierzchni przegrody nie została w sposób istotny naruszona przez nałożoną powłokę. Na Rys. 2 przedstawiono tę przegrodę z nałożoną powłoką, zastosowaną jako wszczep u myszy, po miesiącu od wykonania wszczepienia.
Przykład 3
[0024] Przykład poprzedni powtórzono z zastosowaniem filtru Millipore Inc., typ SS 3.0 m. Otrzymano takie same wyniki jak w Przykładzie 1.
Inne aspekty wynalazku
[0025] Główne założenia tego wynalazku mają zastosowanie nie tylko do półprzepuszczalnych przegród zawierających tkanki czy komórki z organizmu dawcy do przeszczepienia do ciała biorcy, króre w nim przeżywają dzięki dopływowi składników odżywczych czy tlenu z organizmu biorcy. Idea wynalazku ma również zastosowanie do przyrządów, elementów pomiarowych, itp., które mają być wprowadzone do żywego organizmu w celu umożliwienia transportu substancji przez półprzepuszczalną przegrodę z przeciwnej strony ścianki tej przegrody. Przykładem takiego zastosowania może być czujnik wykrywający poziom cukru we krwi, gdzie półprzepuszczalna przegroda otacza element tego czujnika, który jest wszczepiony do organizmu człowieka i połączony z pompą insulinową w celu wprowadzania insuliny, odpowiednio do oznaczonej zawartości cukru we krwi, za pomocą zestawu infuzyjnego wprowadzonego do ciała i również wyposażonego w przegrodę półprzepuszczalną według wynalazku. Problem będący przedmiotem tego wynalazku, którym jest uniemożliwienie wzrostu tkanki łącznej w sąsiedztwie przegrody rozwiązywany jest w takich przypadkach również za pomocą przepuszczalnej powłoki tytanowej w sposób opisany powyżej.
[0026] Przykłady innych zastosowań tego wynalazku obejmują: wydzielanie leków (chemioterapia, środki przeciwbólowe, itp.), przeszczepy organów (nerka, wątroba, itp.). komórki w woreczkach wytwarzające erytropoetynę, czynniki koagulacyjne, hormon wzrostu, interferon , parathormony, insulinę, itp., sztuczne organy (na przykład komórki wątroby) czy metodę mikrodializy.
[0027] Oczywiście niniejszy wynalazek ma zastosowanie zarówno dla ludzi jak i zwierząt.
[0028] Powłoka metalowa może składać się z jednej lub kilku oddzielnie nałożonych warstw metalu (folia lub proszek), a w miarę potrzeby dla uzyskania wybiórczego transportu substancji przez wszczep warstwa lub warstwy tytanu we wszczepie mogą mieć budowę typu "sandwich" ("kanapkową", tj. jedna warstwa na drugiej warstwie) w odniesieniu do przegród.
Inne przykłady
Przykład 4 i 5
[0029] Rysunki od 4a do 4c oraz od 6a do 5c ilustrują wyniki badań nad konwencjonalnymi półprzepuszczalnymi przegrodami (błonami) o nazwie handlowej TF-200 oraz Versapor® 200 firmy Pall Corporation. Budowę błon niemetalizowanych i metalizowanych tytanem badano przy użyciu mikroskopu LEICA M76 z zewnętrznym źródłem światła. Nie stwierdzono żadnych zmian w budowie błon po ich pokryciu jedną warstwą tytanu w porównaniu z błonami niemetalizowanymi. Budowę błony badano również po inkubacji błon metalizowanych tytanem w roztworze wodnym nie stwierdzając żadnych zmian. Tak więc budowa błony została zachowana zarówno po operacji nałożenia metalowej powłoki jak i po późniejszym wystawieniu jej na działanie roztworu wodnego. Rysunek 4a pokazuje błonę TF-200 bez jej modyfikacji, czyli bez warstwy tytanowej. Rys. 4b przedstawia błonę TF-200 pokrytą jedną warstwą tytanu na sucho, zaś Rys. 4c pokazuje błonę TF-200 pokrytą jedną warstwą tytanu na mokro. Rys. 5a przedstawia błonę Versapor® 200 bez modyfikacji, to znaczy bez warstwy tytanowej. Rys. 5b pokazuje błonę Versapor® 200 pokrytą jedną warstwą tytanu na sucho, zaś Rys. 5c ilustruje błonę Versapor® 200 pokrytą jedną warstwą tytanu na mokro.
Przykład 6 i 7
[0030] Rysunki od 6a do 6d oraz od 7a do 7c ilustrują wyniki dializy z użyciem błon Versapor® 200 i HT 200 firmy Pall Corporation. Rys. 6a przedstawia zestaw do przeprowadzania testu na efektywność dializy we wspomnianych warunkach, który składa się z następujących elementów: zlewka 10, komora dializacyjna 11, błona 12, i mieszadło magnetyczne 13. Komorę dializacyjną 11 napełniono 1 ml ludzkiej krwi zawierającej 0,5 M roztwór glukozy i 87,5 g/L (2,5 U/L) insuliny, po czym w komorze założono błonę. Dializę wykonano w zlewce wypełnionej 50 ml buforu PBS (PBS = roztwór izotoniczny buforowany fosforanami). Odbierano próbki po czasie 0, 15, 30, 60, 120, 180, 240 i 300 minut i poddawano analizie widmowej oznaczając absorbancję przy długości fali 280 nm w celu oznaczenia stężenia glukozy, stężenia białek oraz zawartości IgG. Nie stwierdzono żadnej różnicy w efektywności dializy pomiędzy błonami Versapor® 200 i HT 200 pokrytymi tytanem a wymienionymi błonami niepokrytymi tytanem. Rys. 6b przedstawia wynik dializy glukozy przez błonę Versapor® 200, Rys. 6c ilustruje wynik dializy białek przez błonę Versapor® 200 zaś Rys. 6d ilustruje wynik dializy IgG przez błonę Versapor® 200. Rys. 7a przedstawia wynik dializy glukozy przez błonę HT-200, Rys. 7b przedstawia wynik dializy białek przez błonę HT 200, a Rys. 7c przedstawia wynik dializy IgG przez błonę HT-200.
Przykład 8
[0031] Wyrób o nazwie TheraCyte, pokazane na Rys. 8a, zasadniczo stanowi worek jaki powstał między dwoma arkuszami błony. Każdy arkusz zbudowany jest z trzech warstw: jedna zewnętrzna warstwa wykonana jest z tkaniny poliestrowej, warstwa środkowa z politetrafluoroetylenu (PTFE, teflon) z porami o wielkości 5 m, i warstwa wewnętrzna, z PTFE o wielkości porów 0,45 m. Obydwie warstwy zewnętrzne mają za zadanie ułatwiać tworzenie się naczyń krwionośnych. Warstwa wewnętrzna jest warstwą izolacyjną oddzielającą komórki zewnętrzne od wewnętrznych.
[0032] Wspomniany powyżej wyrób TheraCyte badano przed nałożeniem jednej lub dwóch warstw tytanu oraz po ich nałożeniu za pomocą mikroskopu typu LEICA M76 z zewnętrznym źródłem światła i mikroskopem świetlnym typu Nikon Eclipse E600. Nie stwierdzono żadnych zmian w strukturze wspomnianego wyrobu skutkiem zastosowania procesu nakładania warstw tytanowych. Rys. 8b ilustruje wspomniany wyrób bez modyfikacji (bez pokrywania warstwą tytanową). Rys. 8c ilustruje wspomniany wyrób z jedną warstwą tytanową a Rys. 8d ilustruje wspomniany wyrób z dwoma warstwami tytanowymi. Rys. od 8e do 8g ilustruje wspomniany wyrób, odpowiednio, bez modyfikacji, z jedną warstwą tytanową i z dwoma warstwami tytanowymi. Rys. od 8h do 8j ilustruje wspomniany wyrób, odpowiednio, bez modyfikacji, oraz z jedną wartwą tytanową bądź z dwoma warstwami tytanowymi.
[0033] Dializę przeprowadzono z wyżej wymienionymi wyrobami w 0,9% roztworze NaCl. Do wyrobu wprowadzano, odpowiednio, insulinę lub znakowaną radioizotopem glukozę. Próbki odbierano po czasie: 0, 15, 30, 60, 120 i 180 minut od momentu rozpoczęcia dializy. Glukozę wykrywano stosując ciekły licznik scyntylacyjny a insulinę stosując test izoinsulinowy immunoenzymatyczny (EIA). Wynik pokazano na Rys. 8n i 8o. Rys. 8n ilustruje dializę glukozy dla wyrobu TheraCyte. Cyfra wskazuje na liczbę warstw tytanowych w wyrobie. Litera K oznacza wyrób niezmodyfikowany. Rys. 8o przedstawia wynik dializy insuliny dla wyrobu TheraCyte. Cyfrą oznaczono liczbę warstw naniesionych na błony w tym wyrobie. Próbka kontrolna (Control) odnosi się do wyrobu niezmodyfikowanego.
[0034] Wyrób TheraCyte wszczepiono samcom szczurów szczepu wsobnego Lewis. Po 17 dniach urządzenia te usunięto. W skali makroskopowej wyrób niemetalizowany otoczony jest kapsułą zawierającą ciecz surowiczą. Przekroje poprzeczne ujawniają istnienie bliższego kontaktu tkanki w wyrobie metalizowanym tytanem w porównaniu z wyrobem niemetalizowanym. Porównaj Rys. od 8p do 8s od góry: Rys. 8p, dwie warstwy tytanowe, Rys. 8r, próbka kontrolna (błony niepowlekane, wyrób niemodyfikowany), Rys. 8s, pojedyncza warstwa tytanu. Rys. 8t przedstawia przekrój poprzeczny przez urządzenie (niemodyfikowane, niepowlekane tytanem), Rys. 8u ilustruje przekrój poprzeczny przez urządzenie posiadające jedną warstwę tytanową, a Rys. 8v ilustruje przekrój poprzeczny przez wyrób posiadający dwie warstwy tytanowe.
[0035] Rys. 9a i 9b ilustrują woreczki TheraCyte wszczepione myszom pod mięśnie piersiowe. Woreczki pozostawiono wewnątrz zwierzęcia przez 41 dni a następnie do woreczków tuch wstrzyknięto roztwór glukozy-14C o stężeniu 30 mMol/L. Pobrano próbki tak jak to pokazano na Rys. X. Na rysunku widać wyraźnie, że poziom glukozy, określony zarówno z rzeczywistego jej stężenia jak i z pomiarów radioaktywności, jest stały i wynosi około 10 mmol/L do 20 minuty, po czym wzrasta do 25 mmol/L po 75 minutach u zwierzęcia kontrolnego z woreczkiem bez błon pokrytych tytanem (ciemne kółka). Natomiast poziom glukozy zaczyna rosnąć już po 5 minutach u zwierząt, którym wszczepiono woreczek z powłoką tytanową.
[0036] Wynik ten pozostaje w pełni zgodny ze stwierdzeniem, że powłoka tytanowa jest dużo silniej związana z otaczającą ją tkanką, pozwalając tym samym na bezpośrednią dyfuzję glukozy do tych tkanek i otaczających je naczyń krwionośnych. Natomiast u zwierzęcia kontrolnego kontakt pomiędzy woreczkiem a tkanką nie jest bardzo bliski, co powoduje powstanie szczeliny pomiędzy materiałem a tkanką i włóknistą kapsułą tkankową. Glukoza, zanim dotrze do naczynia tkanki, musi dyfundować do płynu obecnego w szczelinie i do włóknistej kapsuły tkankowej. Tłumaczy to opóźnienie wzrostu stężenia glukozy.
[0037] Rys 10 przedstawia widok części wszczepionego woreczka TheraCyte pod mikroskopem elektronowym przy powiększeniu 11,500-krotnym. Biaława część po lewej stronie zdjęcia to włókno warstwy tkaniny poliestrowej, czarny "sznurek" w jej pobliżu odpowiada powłoce tytanowej a resztę stanowi tkanka organizmu, znajdująca się w sąsiedztwie powłoki tytanowej. Powłoka tytanowa posiada grubość około 100 nm.
Zastrzeżenia patentowe
1.Wszczep biosyntetyczny składający się z półprzepuszczalnej przegrody o budowie, która:
- pozwala na dyfuzję lub zapobiega dyfuzji określonych substancji/ materiałów/ cząsteczek/ komórek/ linii komórek od jednej ze stron przegrody na jej drugą , przeciwną,stronę, oraz
- pozwala na dyfuzję lub zapobiega dyfuzji w kierunku od wspomnianej strony przeciwnej przegrody określonych substancji, które są takie same lub różniące się od uprzednio wymienionych substancji/ materiałów/ cząsteczek/ komórek/ linii komórek, na drugą, przeciwną, stronę przegrody,
znamienny tym, że wspomniana półprzepuszczalna przegroda pokryta jest na powierzchni powłoką czynnego biologicznie metalu, przy czym wspomniana powłoka na powierzchni jest przepuszczalna w taki sposób, aby umożliwić wspomniane procesy dyfuzji lub by im przeszkodzić.
2.Wszczep zastrzeżony w zastrzeżeniu 1, znamienny tym, że wspomniane określone substancje/ materiały/ cząsteczki/ komórki/ linie komórek wytwarzane są w organizmie ludzkim lub w organizmie zwierzęcym.
3.Wszczep zastrzeżony w zastrzeżeniach 1 i 2, znamienny tym, że wspomniana powłoka powierzchniowa jest siatką ze wspomnianego czynnego biologicznie metalu.
4.Wszczep zastrzeżony w zastrzeżeniach od 1 do 3, znamienny tym, że wspomniany biologicznie czynny metal wybrany jest spośród tytanu, cyrkonu, tantalu lub ich stopu.
5.Wszczep zastrzeżony w zastrzeżeniu 4, znamienny tym, że wspomniany biologicznie czynny metal jest tytanem.
6.Wszczep zastrzeżony w zastrzeżeniach od 1 do 5, znamienny tym, że metal ten naniesiony jest w procesie rozpylania, na przykład przez napylanie lub naparowanie.
7.Wszczep zastrzeżony w zastrzeżeniach od 1 do 6, znamienny tym, że ma on postać pojemnika.
8.Wszczep zastrzeżony w zastrzeżeniach od 1 do 7, znamienny tym, że wspomniana przegroda posiada wspomnianą powłokę na powierzchni po obu jej stronach.
9.Wszczep zastrzeżony w zastrzeżeniach od 1 do 8, znamienny tym, że powłoka/ powłoki posiada/ posiadają grubość od 5 nm, przykładowo od 50 do 250 nm.
10.Wszczep zastrzeżony w zastrzeżeniach od 1 do 9, znamienny tym, że półprzepuszczalna przegroda ma taką budowę, która:
- pozwala na dyfuzję składników odżywczych komórek organizmu i tlenu z ciała biorcy na drugą, przeciwną. stronę przegrody, gdzie znajduje się organ/ komórki dawcy, oraz
- pozwala na dyfuzję ze wspomnianej strony przeciwnej wcześniej określonych substancji wytwarzanych przez organ lub komórki dawcy.
11.Wszczep zastrzeżony w zastrzeżeniach od 1 do 9, znamienny tym, że wyposażony jest on w czujnik umieszczony wewnątrz wspomnianej półprzepuszczalnej przegrody, zgodnie z którym wspomniana półprzepuszczalna przegroda jest tak zbudowana, że pozwala
- na dyfuzję substancji z jednej strony tej przegrody na jej drugą, przeciwną stronę, przy czym wspomniana substancja wykrywalna jest przez wspomniany czujnik, oraz
- na dyfuzję wspomnianej substancji ze wspomnianej strony przeciwnej.
12.Wszczep zastrzeżony w zastrzeżeniu 11, znamienny tym, że wspomnianą substancją jest cukier we krwi, a wspomniany czujnik jest czujnikiem wykrywającym cukier we krwi.
13.Pompą insulinowa składająca się z:
- biosyntetycznego wszczepu zastrzeżonego w zastrzeżeniu 12, oraz
- zestawu infuzyjnego do podawania insuliny na podstawie wykrywanego poziomu cukru we krwi za pomocą wspomnianego czujnika wspomnianego biosyntetycznego wszczepu, zgodnie z którym wspomniany zestaw infuzyjny posiada przegrodę półprzepuszczalną z powłoką z biologicznie czynnego metalu na jej powierzchni, przy czym wspomniana powłoka jest przepuszczalna w taki sposób, że pozwala na dyfuzję insuliny przez wspomnianą półprzepuszczalną przegrodę.
(Zastrzeżenia patentowe dodatkowo w języku niemieckim i francuskim)
(Rysunki - od Rys 1 do Rys. 10 - zdjęcia i wykresy - od strony 9 do 20 oryginału patentu)
Teksty na rysunkach:
Rys. 6b, 6c, 6d - Non-modified = niemodyfikowana
Modified = modyfikowana
Time = Czas
Rys. 7a, 7b, 7c Non-modified = niemodyfikowana
Modified = modyfikowana
Time = Czas
Rys. 8a woven polyester = tkanina poliestrowa
nonwoven polyester = włóknina poliestrowa
Rys. 8n Time = Czas
Rys. 8o Time = Czas
Control - Próbka kontrolna
Rys 9a Thyracite bag - 14C glucose = woreczek Thyracyte z glukozą znaczoną radioizotopem 14C
Time = Czas
Rys 9b Thyracite bag - 30 mmol/L glucose = woreczek Thyracyte z 30 mmol/L glukozy
Time = Czas
Bloodsugar = Cukier we krwi; Time = Czas, min; cpm - imp/min
ODNOŚNIKI CYTOWANE W NINIEJSZYM OPISIE PATENTOWYM
Wykaz odnośników cytowanych przez zgłaszającego jest zamieszczony wyłącznie dla wygody czytelnika. Nie stanowi on części dokumentu patentu europejskiego. Chociaż starano się sporządzić wykaz odnośników z najwyższą starannością, to nie można wykluczyć błędów czy opuszczeń, za które Europejski Urząd Patentowy nie przyjmuje na siebie odpowiedzialności.
Dokumenty patentowe cytowane w niniejszym opisie patentowym
US 6632244 A [0002]
WO 0202745 A [0002]
US 6632244 B [0002]
US 5876742 A [0003]
US 5782912 A [0004] [0005]
US 6372244 B {0006] [0017]
I have been doing translations for the last thirty years on a professional scale. My fields are multiple and diversified: pharmacy, chemistry, environmental engineering, electronics: I am capable of translating specialist texts from Polish, Russian, Portuguese, Italian, Spanish into English. My daily load is 10 standard paged a day (320 words per page)
Keywords: pharmaceuticals, clinical trials, power engineering. windfarm projects, building materials additives, sewage treatment plants,
Blue Board entries made by this user 
CV/Resume (DOC)